INTRODUCCIÓN

Por muchos años se consideró que las Amebas de Vida Libre (AVL) eran protozoos comensales simples e inofensivos, que se encuentran ampliamente distribuidos en la naturaleza, hasta que se demostró que un grupo de ellas son capaces de producir afecciones graves en la especie humana, como cuadros tisulares (Meningoencefalitis Amebiana Primaria; Encefalitis Granulomatosa Amebiana), colonizar el epitelio corneal en individuos inmunocompetentes y producir Queratitis, especialmente en usuarios permanentes de lentes de contacto. La literatura describe diversos métodos o técnicas de diagnóstico de Laboratorio como ayuda para corroborar el diagnóstico clínico de Queratitis por Acanthamoeba sp.; como hasta ahora las diferentes técnicas de biología molecular aplicadas aún no se destinan a diagnóstico clínico, sino que a determinaciones taxonómicas de las distintas especies, es el aislamiento a través del cultivo con medio ANNE (según Page), de Acanthamoeba sp. el método más efectivo de los existentes en muestra de raspado corneal. Por la importancia de tener un diagnóstico rápido y certero en esta patología ocular, consideramos relevante dar a conocer el hallazgo de estructuras altamente sugerentes de quistes de Acanthamoeba sp. en una lente de contacto de usuario permanente, cuya muestra de raspado de cornea resulto positivo a Acanthamoeba sp. en medio de cultivo ANNE.

MATERIAL Y MÉTODO

A lente de contacto de tipo flexible, de paciente de aproximadamente 45 años, con diagnóstico presuntivo de Queratitis por Acanthamoeba sp., fijado en formalina al 10% e incluido en parafina, se le realizaron cortes en micrótomo Lipshaw de 5 µm de espesor, teñidas con PAS (Periodic Acid Schiff) y montadas en Entellan. Los cortes se observaron en microscopio Westover, con aumentos de 10x y 40x, examinados por el Anátomo Patólogo del Laboratorio Histopatológico Histomed y enviados posteriormente al Laboratorio de Parasitología de la Escuela de Tecnología Médica, Facultad de Medicina. Universidad de Chile, con la finalidad de obtener opiniones calificadas. Al mismo tiempo se envía una muestra de raspado de cornea al Instituto de Salud Pública, Laboratorio de Referencia de Parasitología, para el proceso de cultivo en ANNE (Agar No Nutriente).

RESULTADOS

Al observar al microscopio con objetivo 10x (aumento 100), se observa una estructura laxa, acelular, sin presencia de infiltración, de color celeste que corresponden a fibras del lente, con un elemento próximo relativamente redondo de color fucsia. Al aplicar mayor aumento (400), se observa con claridad estas estructuras que están dentro y fuera de estos cortes laxos. La coloración fucsia abarca todo el cuerpo incluido el soma y la pared, con un tamaño estándar entre 10-15 µm. No se visualiza núcleo ni cariosoma. La cutícula que corresponde a la pared se manifiesta en forma irregular y poliédrica, altamente sugerente de quistes de Acanthamoeba sp.. Cabe destacar que el resultado del cultivo de la muestra de raspado de cornea del mismo paciente, mostró desarrollo de trofozoitos de Acanthamoeba sp al incubar la muestra en medio de cultivo ANNE, a los 7 días.

CONCLUSION:

Aunque el medio de cultivo ANNE es uno de los métodos más utilizados para el diagnóstico de Acanthamoeba, tiene el inconveniente de la demora en el resultado, que es de 7 días habitualmente. Por esta razón, una vez que se realicen cortes de otros lentes y se corrobore en forma enfática que las estructuras teñidas de fucsia corresponden a quistes de Acanthamoeba sp. estaríamos solucionando el problema  de la tardanza del informe, debido a que el procedimiento aplicado en este caso es rápido y la lectura se hace in situ con un microscopio óptico con buena resolución, obteniendo el clínico el resultado a las 24 hrs. lo que permite iniciar el tratamiento en forma oportuna, que es vital en esta patología ocular para  eliminar el parásito y obtener curación satisfactoria.